胶体金免疫层析产品开发经验分享

一、PH在胶体金技术中是非常重要的，不同抗体的标记的PH主要是根据最后的实验结果(阳性程度,敏感度等)来确定的,每种产品的PH都要摸索,没有固定的 
1、合适的PH决定标记蛋白与裸金的结合效率，以及结合的稳定性
2、适当的PH对于标记后的胶体金的液态保存的稳定性有影响
3、适当的PH对于产品的假阳性以及假阴性有一定的控制
4、适当的PH可以调整T线的显色强度

二、最适蛋白标记量：直接把不同的标记量的金做成半成品，看标记浓度低到啥程度对结果没影响，在那个基础上再适当提高点浓度就成了。

三、表面活性剂有破膜的作用，红细胞膜破了，血红蛋白出来了，背景自然也就高了，当然并不是所有的表面活性剂都有破膜的作用或者破膜作用并不严重。用全血过滤膜只能过滤红细胞，但是表面活性剂选择不对，背景还是不会有太大的改善。如果是用快速诊断方法检测，建议使用新鲜的血液，超过一周的最好就处理掉把，血液长时间放置会自发性的溶血，保存在2-8度，低温冻存更会加速溶血。全血检测需加入全血分离膜，分离血浆和血细胞（主要是红细胞），全血分离膜是否要处理看具体的要求，以及使用的种类。表面活性剂的种类及浓度如果控制不好会加速红细胞的破裂，

四、T线边缘深中间浅的原因：样品垫或者样品稀释液的配方：注重PH，离子强度，表面活性剂三方面。酸碱度一般可以选择7.5-9之间
离子强度可以在20-150mM之间
表面活性剂，多尝试下不同的浓度和种类，一般常用的是Tween,TritonX-100,浓度在0.1-1%左右

五、释放慢可能有几个原因：
1.金标垫本身的材质决定。但是这个可能性比较小
2.如果你是浸泡法处理，处理液中蛋白或者大分子材料，以及糖的浓度都会影响金的释放， 
3.如果你是喷金，金标垫如需预处理，预处理液液有可能影响，原因同上
4.最后一个估计是最不愿遇到的，处理液的配方没有选择好，喷金或者浸泡后，部分胶体金变性聚集，无法层析

阅读：  2016-12-15 09:47:56