预期应用:本试剂盒用于微生物菌体,饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、 牛奶、血清和尿样中菊粉(Inulin)残留的定量检测。
实验原理:本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有菊粉(Inulin)偶联抗原,加入菊粉(Inulin) 标准品或样品,游离菊粉(Inulin)与微孔条上预包被的菊粉(Inulin)偶联抗原互相竞争抗 菊粉(Inulin)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中菊粉(Inulin)含量成反比,通过标准曲线计算样品中菊粉(Inulin)的含量。
试剂盒内容:
1.预包被的菊粉(Inulin)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)
2.菊粉(Inulin)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是: 0 ppb,0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb,8.1 ppb
3.抗菊粉(Inulin)抗体酶结合物:1瓶(6ml)
4.显色液A:1瓶(6ml)
5.显色液B:1瓶(6ml)
6.终止液:1瓶(6ml),2M硫酸
7.样本稀释液:1瓶(10×, 6ml),用于样品稀释用
8.浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板
9.说明书一份
操作步骤:
1 实验须知
1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室 温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2-8℃干燥保存 注:一定保证回温充分,否则影响检测的精确度和准确度。
1.2 使用后请立即将试剂放回2-8℃保存。
1.3 请不要改变分析程序。
1.4 请使用精确的微量移液器。
1.5 操作一旦开始,请不要中断任何程序。
1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作。
1.7 为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样。
1.8 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面。
2 分析步骤
2.1 预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测。
2.2 取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2-8℃保存。
2.3 样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(20×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)。
2.4 在B0孔中加入50?l 0.0ppb标准品溶液。
2.5 在各标准孔中加入50μl的标准品溶液。
2.6 在各样品孔中加入50?l样品溶液。
2.7 在所有孔中加入50?l的抗菊粉(Inulin)抗体酶结合物。
2.8 轻轻晃动反应板几秒钟。
2.9 37℃温浴30min (温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)。
2.10 甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
2.11 洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50?l显色液A,再加50?l显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀。
2.12 37℃温浴10min。
2.13 每孔中加入50?l终止液,混匀。
2.14 在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。
试剂盒性能:
1.本试剂盒检测下限为0.05ppb
2.B0吸光度最佳值应大于1.0
3.试剂盒吸光度板内误差小于8%,板间误差小于15%。
4.用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80%。
5.试剂盒提供的标准曲线范围为0.1ppb-8.1ppb。
6.特异性: 与菊粉(Inulin)交叉反应为 100%
产品货号:11649