酶抑制率法

1 范围

本标准规定了由酶抑制率法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速测定方法。

本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速测定。

2 原理

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关系。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物

(乙酰胆碱)水解，其水解产物显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

3 试剂

3.1pH8.0 缓冲溶液：分别取 11.9 克无水磷酸氢二钾与 3.2 克磷酸二氢钾，用 1000毫升蒸馏水溶解。

3.2 显色剂：分别取 160mg 二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和 15.6mg 碳酸氢纳，用 20ml 缓冲溶液溶解，4°C 冰箱中保存。

3.3 底物：取 25.0mg 硫代乙酰胆碱，加 3.0ml 蒸馏水溶解，摇匀后置 4℃冰箱中保存备用，保存期不超过两周。

3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，按 5.2 测定项操作，ΔA0 值应控制在 0.3 以上。