本试剂盒采用独特的脱腐缓冲液体系，可将土壤样本中的腐殖酸、棕黄酸尽可能去除，并且配有得玻璃珠可有效破碎土壤样本中的各种复杂成分，保证从土壤样本中提取基因组DNA的完整性。使用本试剂盒提取的DNA杂质少、完整性好，可直接用于PCR、酶切等其他分子生物学下游实验。

【使用说明】

1.      裂解缓冲液、Solution S1、Solution S2、Solution S3在低温条件下会产生沉淀，使用前放入37℃水浴，完全溶解后使用。

2.      所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心。

【提取步骤】

1.     取0.25g玻璃珠和500ul 裂解缓冲液至2ml离心管中。

2.     向上述2 ml离心管中加入0.25-0.5g土壤样品，涡旋混匀。

3.     向离心管中加入60 ul Solution S1，涡旋混匀，65℃水浴10min后剧烈涡旋震荡10min。

v  为获得更好的裂解效果，可适当延长水浴和涡旋震荡时间

4.     10,000 rpm离心3min，转移上清（约400ul）至新的2ml离心管中。

v  由于剧烈震荡，离心后上层可能会有泡沫，建议转移上清时采用倾倒的方式，尽量不要将泡沫转移到新的离心管中。

5.     向上清中加入3倍体积的Solution S2，上下颠倒混匀，12,000 rpm离心1min。

6.     转移上清至新的2ml离心管中，加入1/4体积的异丙醇，上下颠倒混匀。

7.     将上一步溶液加到吸附柱中，12,000 rpm离心30s。

v  吸附柱最大载量700ul，请分多次过柱。

8.     弃废液，向吸附柱中加600μl Solution S3，12,000 rpm离心1min。

9.     向吸附柱中加入600μl漂洗液 WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心30s，弃掉废液。

10.  向吸附柱中加入400μl 漂洗液WB, 12,000 rpm离心30秒，弃掉废液。

11.  将吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm离心1min，尽量除去漂洗液。

v  漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。也可以将吸附柱开盖，置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。

12.  小心取出吸附柱，放入一个灭菌的离心管中，在吸附膜的中间部位加 50ul 洗脱缓冲液EB或者TE（洗脱缓冲液事先在60-70℃浴中加热效果更好），室温放置 2 分钟，12,000rpm离心1min。如果需要较多量DNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，再离心1min。

v  洗脱体积越大, 洗脱效率越高。如果需要DNA浓度较高, 可以适当减少洗脱体积,但是最小体积不应少于 30ul。

v  本试剂盒提供两种洗脱液EB和TE。EB（10mM Tris-HCl ，pH8.0），不含EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。如DNA需长期保存，可以用TE（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH8.0）洗脱，但是EDTA可能影响下游酶切反应。